近日遇到一例宝妈不规则抗体筛查阳性,鉴定时发现该抗体在抗人球介质中反应性很弱,而在凝聚胺介质中出现完整的反应格局。因此,试验方法的选择与抗原抗体的凝集反应的强度、反应条件、检测方法、反应介质相关。接下来由输血小卫士来报道该抗体的鉴定过程、思路与分析汇报如下,敬请关注。
案例经过
一、简要病史
患者女性,40岁,孕39周,孕5产2,有输血史(具体不详)。
二、输血相容性检测及检测结果
1、常规血型检测结果(表1)
2、不规则抗体筛查检测结果(表2)
3、 直接抗人球蛋白试验检测结果(表3)
4、 患者Rh分型及M抗原检测结果(表4)
以上述检测结果,表明患者血清中可能存在其他血型系统的血型抗体。我们通过红细胞抗体特异性鉴定来进行进一步的试验。
5、红细胞抗体特异性鉴定检测结果(表5)
鉴于上述试验,不规则抗体筛查阳性(表2),而自身对照试验是阴性,说明患者血清中可能有不规则抗体的存在。根据不规则抗体检测试剂抗原谱(图1)和患者Rh分型及M抗原检测结果(表4),可以初步考虑Rh血型系统抗体。从红细胞抗体特异性鉴定检测结果(表5)看,37℃抗人球蛋白卡实验结果的格局无法确定抗体特异性,考虑到Rh血型系统抗体对凝聚胺介质也敏感,故进一步以凝聚胺介质进行抗体特异性鉴定,实验结果表现出抗-E抗体的特异性格局。
案例分析
综合上述试验,结合患者Rh分型及红细胞抗体特异性检测结果,可以判定,患者血清中检出Rh血型系统抗-E抗体。
与患者主管医师沟通,建议产妇提前备血,因此如输注红细胞类血液成分,选择无E抗原的红细胞在37℃条件下盐水、凝聚胺介质和抗人球介质中交叉配血相合的血液进行输注即可。患者住院期间未输血,恢复良好出院。
胎儿出生后,检测新生儿红细胞RhE血型结果是阴性,可以排除来自母体抗-E抗体引起的新生儿溶血症。新生儿体征平稳,黄疸指标尚可,符合出院标准。
知识拓展
01
1.盐水介质法
指将红细胞悬浮于盐水介质中用于检测红细胞抗体,主要筛查IgM类抗体,而不能检测IgG类的抗体。其灵敏度偏低,温度、抗体效价、反应时间等影响检测结果,一些弱的凝集或稀有抗体不能被检测到。
02
2.聚凝胺法
利用低离子溶液让抗体易于接近红细胞表面抗原,通过聚凝胺介质降低红细胞表面的负电荷,从而缩短红细胞之间的正常距离,使正常红细胞形成可逆的非特异性凝集,同时也使IgG类抗体直接凝集红细胞,加入重悬液后非特异性凝集散开,而抗体介导的特异性凝集不会消失。其灵敏度比盐水介质法高,可用来检测IgG类抗体。本方法用时短,试剂及设备成本最低,敏感度高(尤其是Rh系统)。但待测样本不能使用肝素作为抗凝剂,试验温度、加样比例、结果观察时间都会影响实验判读。对Kell系统检测较不灵敏,若需检测Kell系统抗体,须加做抗人球蛋白试验。
03
3.抗人球蛋白法
IgG类不规则抗体通过37℃孵育,可与相应的红细胞表面抗原结合,抗原抗体作用使红细胞致敏,但不能产生肉眼可见凝集,加入抗人球蛋白试剂,与红细胞上不完全抗体结合,出现可见凝集。反应温度、离子强度、反应时间、抗原与抗体的比例、试剂质量等影响检测结果。
04
4.试验方法的选择
与抗原抗体的凝集反应的强度、反应条件、检测方法、反应介质相关。IgM类的抗体在4℃的凝集强度明显大于室温,37℃会有减弱。酶法对Rh、Kidd血型系统的检测效果最好,但会破坏Duffy、MNS等抗原,导致漏检。
图/文:杨尖措 仲海娟
审核:阿尖措 董秋霞